Thèse soutenue le 23 septembre 2024 pour obtenir le grade de docteur de l'Université Grenoble Alpes - Spécialité : Chimie Biologie
Résumé :
La protéase C1s est un élément central dans l’initiation de la voie classique du système du complément. Elle était auparavant considérée comme ciblant exclusivement les protéines C2 et C4 dans cette cascade protéolytique. Des découvertes récentes ont cependant mis en lumière la présence de C1s libre constitutivement active dans certaines pathologies, suggérant un rôle plus large de cette protéase au-delà de l'activation du complément. Parmi les cibles non-canoniques identifiées de C1s figure la protéine HMGB1, initialement décrite comme une protéine nucléaire impliquée
dans la condensation de la chromatine et l'expression des gènes. Des études récentes ont démontré que HMGB1 peut également être localisée dans différents compartiments cellulaires et qu'elle joue un rôle crucial dans l'inflammation lorsqu'elle est libérée dans le milieu extracellulaire. Ce projet de thèse avait pour objectif principal d'élucider le rôle du clivage de HMGB1 par C1s dans la modulation de la réponse inflammatoire. Nos travaux ont démontré que les fragments de digestion de HMGB1 possèdent des effets distincts de la protéine entière sur l'activation du complément et la
réponse cytokinique des macrophages. N
ous avons notamment confirmé que la protéine entière active la voie classique du complément lorsqu’elle est fixée à une surface et qu’elle favorise la polarisation M1 des macrophages en réponse aux LPS. En revanche, le fragment f2 est capable d'activer la voie classique du complément même lorsqu’il est en solution, tandis que le fragment f3 inhibe la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires dans les études cellulaires. De plus, nous avons exploré l'impact de l'état d'oxydo-réduction des cystéines sur les effets de HMGB1 et de ses fragments
en utilisant des mutants mimétiques. La digestion de HMGB1 est restreinte lorsque la protéine est sous forme disulfure, suggérant un rôle important du pont disulfure dans l’accès aux sites de digestion par C1s. Les formes redox de la protéine entière ne semblent pas affecter sa capacité à activer le complément, tandis que le fragment f2 oxydé pourrait perdre sa capacité d'activation en solution. Ces résultats révèlent que le clivage de HMGB1 par C1s agit comme un chronomètre de l’inflammation, orchestrant la réponse inflammatoire via la transition d’une phase d’amplification pro-inflammatoire
à une phase de résolution. Ces découvertes ouvrent de nouvelles perspectives pour la compréhension des mécanismes complexes de l'inflammation et le développement de thérapies pour le traitement de pathologies inflammatoires
Jury :
Rapporteur : Lubka Roumenina
Rapportrice : Laure Yatime
Examinateur : Fabrice Bertille
Examinatrice : Emmanuelle Tillet
Directrice de thèse : Véronique Rossi-EchinardD-
Co-directeur de thèse : Thierry Rabilloud
Mots clés :
Dialogue, Macrophages, Balance inflammatoire, Complément C1, Alarmine HMGB1